J Clin Invest：揭示USP9X去磷酸化化ALDH1A3并维持GCSs的间充质特性

囊状母细胞膜瘤（GBM）是最常见和破坏普遍性的知觉恶普遍性，其特普遍性在于尤其的内异质普遍性。尽管不太可能在多模式化疗方面拿到了进展，但GBM病患者的结果无论如何令人郁闷。GBM拥有一个细胞膜亚群，称做GBM肿瘤膜（GSCs），不具备自我系统升级活普遍性和多向分化潜能以及是从并能。因此，急需探索针对GSC的新化疗策略。并且，醛脱氢酶（ALDH）超家族包含19种酶，它们将内源和外源醛细胞内出相应的衍生物。ALDH1A3是主要的ALDH同工酶，进行人体细胞膜的各种生理步骤。更多的证词说明，ALDH1A3在前列腺癌肿瘤膜（CSCs）当中表现借助于高活普遍性，并影响这些细胞膜内的各种生物学特普遍性。在GBM当中，已辨认出ALDH1A3作为保有两者之间充质（MES）GSC的自我系统升级和致瘤普遍性的关键分子结构。然而，MES GSCs当中ALDH1A3失调的选择性无论如何是幽灵的。2019年4年末8日，南京医科大学第一附属医院王慧博团队等人在The Journal of Clinical Investigation上发表题为“USP9X deubiquitinates ALDH1A3and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells”的文章，辨认出USP9X是一种真正的DUB，可可调ALDH1A3多亚基酶化和稳定化。并且，USP9X是分析ALDH1A3hi MES GSCs石英砂的关键分子结构，是MES GSCs自我系统升级和致瘤普遍性所需的。同时还评估了USP9X抑制对病患者来源的MES GSC猫狗移植框架的潜在治果。为了考虑到ALDH1A3亚基究竟被亚基酶 - 特异普遍性系统会（UPS）翻译后支配，深入研究执法人员首先用于放线菌酮（CHX）受阻亚基质从头合出并HEK293T细胞膜和正常人星形囊状细胞膜（NHAs）当中的ALDH1A3亚基质水准。实际上，ALDH1A3在CHX处理的8同一时间内逐渐降解并近乎检测不到。此外，用特异普遍性肽MG-132处理细胞膜导致ALDH1A3亚基水准显着缩减。这些数据说明ALDH1A3通过UPS降解。几周，深入研究执法人员谋求鉴定都由ALDH1A3稳定化的潜在DUB，并用于特异性HEK293T细胞膜当中的98DUB的siGENOMERTF月号进行RNAi择优。该深入研究初始择优鉴定了与ALDH1A3隐含特别的4个DUB（USP3，USP9X，USP22和OTUD1）。当这些DUB与HEK293细胞膜当中的ALDH1A3共隐含时，辨认出只有USP9X必需与小分子结构ALDH1A3直接化学键，从而暗示USP9X是支配ALDH1A3稳定普遍性的显着候选物。为了测试这一点，将Flag标记的WT USP9X或甲醇失活的表型C1566A USP9X（在甲醇结构域的一个关键半胱氨酸当中装载点突变）转染到HEK293T细胞膜当中。 WT USP9X而非C1566A表型的隐含以浓度依赖普遍性作法缩减ALDH1A3亚基水准，说明USP9X以依赖于其DUB活普遍性的作法可调ALDH1A3。囊状母细胞膜瘤（GBM）肿瘤膜（GSC）的两者之间充质（MES）流感病毒象征普遍性癌细胞膜亚群，其因其高度侵袭普遍性和对基本上疗法的其会而出名。不太可能已提借助于醛脱氢酶1A3（ALDH1A3）作为保有GSC的MES特普遍性的关键这两项。然而，拥护异常ALDH1A3隐含的选择性无论如何或许。在该深入研究当中，深入研究执法人员辨认出亚基酶特异普遍性亚基酶9X（USP9X）是MES GSC当中ALDH1A3的真正去亚基酶化酶。 USP9X与ALDH1A3化学键，解聚并稳定化。此外，深入研究结果推断FACS分选的USP9Xhi细胞膜石英砂不具备高ALDH1A3活普遍性和理论上致瘤并能的MES GSC。USP9X的消耗显着调高ALDH1A3，导致MES GSC的自我系统升级和致瘤并能的无法控制，这可以通过ALDH1A3的癌变隐含得到很大程度的挽救。此外，深入研究执法人员还推论USP9X肽WP1130抑制ALDH1A3降解并且在MES GSC则有的原位猫狗移植框架当中推断借助于显着的化疗功用。另外，USP9X与原发普遍性人GBM样品当中的ALDH1A3隐含强烈特别，并且对于不具备MES亚组的病患者不具备预后价值。总的来说，深入研究结果概述了USP9X作为ALDH1A3亚基稳定化的关键去亚基酶化酶和GSC定向化疗的潜在靶点。早期借助于处：Zhengxin Chen，et al.USP9X deubiquitinates ALDH1A3 and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells.J Clin Invest.April 8， 2019